V形扩增曲线
V形扩增曲线
扩增微弱或者信号很弱
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ROX信号不稳定
扩增曲线不光滑
原因：信号太弱
解决方法
•使用高质量的探针
•补救方法：
1.7000的SDS软件升级到v1.1
2.关闭ROX校正，重新分析数据
关闭ROX校正的效果
ROX帮助故障诊断(1)
现象：重复性很差
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正常的原始数据
原因：盖子未盖紧，溶液蒸发
排除蒸发的数据后
ROX帮助故障诊断(2)
现象：山坡形扩增曲线
原始数据显示有蒸发
引物二聚体SYBR Green I®化学，Dissociation curve试验
•推荐措施：提高引物设计质量，
避免形成引物二聚体
•补救措施：优化引物浓度和退火温度
•也许：专设80度步骤收集信号？
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