PCR基因扩增及扩增产物的回收

因为PCR产物会有一些副产物，所以要用电泳的方法分离各种PCR产物。这样也能分离TaqE等杂质。

为了分辨PCR产物和PCR副产品，需要跑一个分子量marker，我们的产物是1.6kp。

用TAE的原因是高严可以降低Agarose熔点，促进之后的DNA 吸附。

3 PCR产物的回收（玻璃奶吸附法）

1)

紫外灯下切胶，称胶重

SYBR会使DNA部分显出绿色荧光，在紫外灯下辨认绿色荧光，可将胶切下。

2)

每100mg胶加入300 uL溶胶液，50 ^oC溶胶

让DNA充分释放到液体中。

3)

将在-20 ^oC冻存的玻璃奶解冻，振匀！！

玻璃奶为细微的玻璃小颗粒，因酷似奶状而得名。它为悬浊液，而可以起吸附作用的小颗粒会沉降下来，所以，只有摇匀，我们才能渠道足量的玻璃小颗粒，完成分离的过程。

4)

在溶解后的胶液中加入10 uL玻璃奶，吹打均匀，冰浴沉淀10min， 10,000rpm离心1min，去上清。

这是一个类似于吸附层析的过程。DNA会特异的吸附于玻璃奶的小颗粒上，而胶不会吸附于其上，故可以起到分离的效果。

高盐能促进吸附。

5)

在离心所得沉淀中加入200 uL稀释浓缩洗胶液（3体积浓缩洗胶液加入7体积无水乙醇即得稀释液），吹打均匀，10,000rpm离心1min，去上清，如此洗两次。