定量PCR
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定量PCR

点击:   作者:   来源:  时间: 2007-03-06  本站论坛


(2) PCR 扩增反应条件:94℃预变性3min;然后进行30 个循环反应,其温度循环条件为:94℃变性1min,55℃退火1min,72 ℃延伸1min;循环结束后72℃再延伸5min。
(3) PCR产物经在2%琼脂糖凝胶上电泳(方法与试验二相同)后用凝胶成像系统及相关软件进行分析,样品待测基因cDNA条带与竞争标准cDNA条带可据片断大小而区分并定量。根据样品待测基因cDNA 条带与竞争标准cDNA 条带亮度之比,则可利用竞争标准cDNA确定组织样品待测基因cDNA含量,再通过样品待测基因cDNA的PCR产物分子量将其含量换算成待测基因mRNA数量。

 

 


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