DNA形成结合物,在紫外灯下能发射荧光,使
EB的荧光强度增强
80~
100倍,所以,电泳后凝胶在紫外灯下可直接观察。一般肉眼观察
DNA量可达
10ng,其荧光强度与
DNA含量成正比。
DNA分子在凝胶中泳动速度决定于电荷效应及分子效应。前者由所带净电荷量决定,而后者与分子大小及构型有关。按照DNA分子大小,其凝胶浓度可做不同的调整。有条件的实验室也可用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分析扩增的DNA片段。
表22-2 电泳检测扩增结果,EB荧光显色(254nm)
|
琼脂糖(%) |
kb |
PAGR(%) |
bp |
|
0.3 |
60~5 |
3.5 |
100~1000 |
|
0.6 |
20~1 |
|
|
|
0.7 |
10~0.8 |
5.0 |
80~500 |
|
0.9 |
7~0.5 |
8.0 |
60~400 |
|
1.2 |
6~0.4 |
12.0 |
40~200 |
|
1.5 |
4~0.2 |
20.0 |
10~100 |
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