PCR技术与病毒性肝炎检验及病程跟踪
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PCR技术与病毒性肝炎检验及病程跟踪

点击:   作者:   来源:  时间: 1970-01-01  本站论坛
HBSAg没有随之的“二对半”转化,有的先单个指标长期存在,更有些病人“二对半”结果全阴,却表现为进行慢性肝炎病症及体征。应用PCR检测发现,大多数大三阳病人血清中能够检出HBV DNA(检出率在96%左右)与大三阳病人血清中含有乙肝病毒,处于感染高峰符合。但PCR检测表明,有相当一部分人“E”抗原转化为“E”抗体后,其血清中仍有HBV DNA存在(检出率约30%)说明“E”系统转化后,有些病人HBV DNA仍未消失,病毒并未停止复制。更甚至,研究发现在20-30HBSAg抗体阳性的病人体内仍用PCR法检出HBV DNA。说明HBSAg系统在血清转化后仍有可能存在病毒的复制,这些现象都提示EIA指标推测病人病情的变化有其一定的局限性。Ulrich等用PCR法检测系列稀释感染黑猩猩血清,发现PCR检测的最低极限量低于感染黑猩猩的最低感染量。我们用正常人血清稀释乙肝感染血清发现,将感染血清稀释到5万倍仍能检出HBV DNA,因此,PCR法检测HBV DNA是一种可靠且简单易行的判断HBV感染的指标,只有病人体内HBV DNA消失才能认为病人恢复。小三阳病人血清中HBV DNA转阴率约为60-70%,这与病毒遗传物质突变,复制暂停,整合状态,及血清HBV病毒炎症清除使血清中的HBV DNA消失或下降至极低浓度有关。这种情况下并不表示病人恢复。因此,对于血清HBV DNA转阴病人应理一步检测其外周血白细胞内有无HBV DNA持续存在,并随访复查血清HBV DNA以免误诊。同时,PCR检测有半定量的特性,可以提示病人HBV DNA复制状态的动态变化,一种最理想的病人病情动态变化的跟踪方法,对丙肝病毒感染人的跟踪也有类似的结果。由于抗体在体内的变化有一定的延滞性,往往不能正确机体的感染状况,RT-PCR法的应用使之得改善。目前,许多学者将RT-PCR法用干扰素治疗丙肝病人疗效研究,并且得到了可喜的成果。

四、PCR与献血员的筛选。

目前,我国绝大多数医疗单位采用RPHAELISA法筛选HBSAg阴性者作为合格的献血员,相当数量的献血员没有检测其HCV的标志。由于EIA法检测水平较低,有相当数量乙肝病毒极低水平表达的病人被漏检。米晓枫报道563例输血后随访人中竞有9.94%出现输血后肝炎发病率可达50%。上海医科大学肝癌研究所余竹元研究发现,正常供血员中有6%左右的HBV DNA阳性,而正是这种仅仅HBV DNAHCV RNA阳必性,没有其它指证的供血源对于肝炎病毒的传播具有很大的危险性,应引起足够的重视,这也充分体现了PCR技术在献血员筛选中的重要意义。建议有条件的地方能够尽量采用PCR法作为筛选供血员的指标。


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