以0.5U为间隔适当减少酶量
退火温度
退火温度过低
适当提高退火温度或采用二阶段温度法
PCR循环次数
PCR循环次数过多
减少PCR循环次数
4. 操作多份样品时,制备反应混合液,先将dNTP、缓冲液、引物和酶混合好,然后分装,这样即可以减少操作,避免污染,又可以增加反应的精确度;5. 最后加入反应模板,加入后盖紧反应管
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