方法二： CASsuper One-Step Competent Cell Preps Kit 采用一种简单便捷的方法处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞，便于质粒DNA的转化，可满足一般实验的要求。与CaCl2法相比具有多种优点：使用方便，只需一步即可完成感受态细胞的制备；转化效率略高于CaCl2法，一般可达106-108cfu/μg，满足一般实验需要；感受态细胞制成后即可保存于-70℃,无须加入甘油，并且经长期保存活力无明显下降。
1、 从液氮或低温冰箱中取出的大肠杆菌冻存菌，在LB平板上划线，37度过夜至长出单菌落。挑形态饱满的单菌落2个，分别接种5ml LB培养基中，37℃，250rpm， 过夜培养。
2、 次日从5ml LB培养物吸取200μl转入50ml LB培养基中（250ml 锥形瓶），37 ℃，250rpm培养2小时，此时OD600约0.4—0.5。
3、 吸取1ml菌液到1.5ml离心管里，5000rpm离心5分钟，弃去上清。
4、 加入100μl预冷的Solution A，悬浮菌体，冰浴30分钟。
5、 此时感受态细胞已经制成可立即使用或-70℃保存。
注意事项：1、 所用器具一定要清洁；
2、 操作步骤2 中培养基的装量也是很重要的，建议装量不要高于此值：500ml 锥形 瓶装100ml培养基，250ml锥形瓶装50ml培养基；
3、 在收获菌体前半小时还可以在培养基中加入20mM的MgCl2 ，效果会更好一些；
4、 为保证细胞处于对数生长期，培养后的菌体的OD值不要高于0.6；
5、 制备感受态细胞时所有操作尽量保证在冰上操作；
6、 细胞转化操作步骤6中也可以不必进行热击，冰浴后直接加入新鲜LB，简化操作步骤，但转化效率低于热击方法，适用于对转化率要求不高的实验。
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