感受态细胞的制备[电转化法]
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感受态细胞的制备[电转化法]

点击:   作者:51protocol收集   来源:  时间: 2007-03-08  本站论坛

体外连接的DNA重组分子导入合适的受体细胞才能大量增殖。为了提高受体菌摄取外源DNA的能力,提高转化效率以获得更多的转化子,人们摸索出了不同的方法处理细菌,使其处于感受态。目前主要采用电转化法和CaCl2法将外源DNA导入受体细胞中,并需要相应地制备电转化感受态细胞和CaCl2感受态细胞。

实验目的:学习感受态细胞的制备过程

实验材料:大肠杆菌菌株DH5a或DH10B

实验原理:电转化法是利用瞬间高压在细胞上打孔,因而需用冰冷的超纯水多次洗涤处于对数生长前期的细胞,以使细胞悬浮液中应含有尽量少的导电离子。转化效率为109~1010 转化子/


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