| 探针制备与非同位素标记新方法 | | 点击： 作者： 来源： 时间： 1970-01-01 本站论坛 |
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(3) PCR-EB，PCR-SCB，套式二次PCR，套式一次PCR，则可用于需要不同灵敏度和特异性的检测。
基因诊断的应用范围正在不断扩大之中，在以下几个领域中具有实用价值：
(1) 遗传病的产前诊断。用胎儿羊膜细胞、羊水甚至母血可以检测胎儿的性别，这在与性染色体关联遗传病诊断中是必要的。对于高发的遗传病如地中海贫血、镰刀状贫血、凝血因子缺乏、DMD等已在临床应用多年，为优生优育作了贡献。对于有遗传倾向的疾病尤其是老年性疾病，如糖尿病、高血脂症，甚至部分肿瘤，均是当前研究的重点，近期内可有突破。
(2) 致病病原体的检测。这些外源入侵的基因，一旦阐明其部分核酸序列，就可以设计引物和探针，用PCR、RT-PCR或杂交方法来检测，其范围包括细菌、病毒、原虫及寄生虫、霉菌、立克次体、衣原体和支原体等一切微生物。基因诊断的特点是可以其基因中的保守区做通用检测，也可以选定差异较大的基因部位做分型检测；即可以做单一病原体的专用检测，也可以将有关的病毒、细胞中不同的品种做一次多元检测，而且检测的灵敏度和特异性都远高于当前的免疫学方法，所需时间已达到临床要求。这对于难以培养的病毒（如HBV）、细菌（如结核、厌氧菌）和原虫（如梅毒螺旋体）等来说尤为适用。
(3) 癌基因的检测和诊断。虽然对癌基因的研究大部分还属于基础阶段，但癌变是由基因变化所导致的这一基本事实已毋庸置疑。所以癌基因、抗癌基因及癌转移基因的研究，离开分子水平的诊断手段是无法进行的。临床上已可应用的例子有白血病残留细胞的定量（包括慢粒和急淋）；肺癌中p53及Rb等抗癌基因的失活；神经胶质瘤中N-mic基因的激活和表达。通过原位杂交观察特定癌基因及抗转移基因的植入和反义寡核苷酸对强表达癌基因的阴断均已成为近代基因治疗的着眼点。
(4) DNA指纹，个体识别，亲子关系鉴别及法医物证。这一为公、检、法部门所瞩目的课题已经在某些国家取得法律认可。肌红蛋白小卫星体基因、珠蛋白基因、ApoB基因等的多态性和重复次数的差异都被应用于鉴定，其灵敏度已达到一根头发、一个细胞、一个精子取得个体特征图谱，这一领域也已发展到骨髓或脏器移植配型乃至动物种系的研究等。
(5) 动、植物检疫。灵敏、特异、快速诊断检测方法是国进出口口岸的门卫。检查出入国门的人员、动植物（种畜、种籽）等是否携带烈性传染病（艾滋、动植物病毒等）病原体，食品、饮料等否带沙门氏菌等，均需要基因诊断手段将这些病菌拒之国门之外，基因诊断是提高我国综合国力的必要保证。
(6) 高科技生物医学领域中的应用。在转基因动植物中检查植入基因的存在。PCR技术尚可提高我国综合国力的必要保证。
随着基因诊断手段的日益完善，它的自动化已指日可待。届时它在临床应用中的地位也将发生明显改变，而将处于举足轻重的位置。
参考文献
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2 John F,Robyt et al.生物化学技术的理论和实验.吉林:吉林大学出版社,1991
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5 林万明主编.核酸探针杂交实验技术.北京:中国科学技术出版社,1991
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8 蔡文琴、王伯云主编。实用免疫细胞化学与核酸分子杂交技术，成都：四川科学技术出版社，1994
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