血红蛋白的测定
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血红蛋白的测定

点击:   作者:   来源:  时间: 2007-04-09  本站论坛
2PO4)140 mg,Triton X-100 1.0 ml,蒸馏水加至1000 ml。过滤后为淡黄色透明液体,pH 7.0~7.4,置有色瓶中加盖、冷暗处保存。如发现试剂变绿、变浑浊则不能使用。
  2.用分光光度计直接测定血红蛋白
  (1)取血、血红蛋白转化和比色同前述1、2的方法,得到标本的吸光度A。
  (2)根据标本吸光度A直接计算出血红蛋白浓度:

式中 A:为波长540nm处标本吸光度。
44:为HiCN在波长540nm,光径1.0cm条件下的毫摩尔消光系数(L· mmol-1· cm-1)。
64485(mg):为Hb的毫克分子量,即1 mmol·L-1 Hb溶液中的Hb毫克数。
1000:为将mg转变为g。
251:为血液稀释倍数。
  因是通过分光光度计比色直接计算出血红蛋白浓度,因此分光光度计的波长和光程必须准确、灵敏度要高、线性好、无杂光,否则会影响结果的准确性。故仪器的校正在测定中十分重要。
  上述介绍的几种方法中,以分光光度计直接测定和比色法测定血红蛋白较为精确,但对分光光度计的精密程度要求较高,分光光度计校正起来较为麻烦。沙里氏血红蛋白计测定操作简便适于基层单位,但准确性稍差。血红蛋白计操作较为简便,因有标准的商品试剂出售,因此也比较精确,目前普遍被医疗单位使用。


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