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影响尿生成的因素实验

点击： 作者： 来源： 时间： 2007-04-09 　本站论坛

[实验目的]
学习用膀胱套管或输尿管套管引流的方法，观察不同生理因素对动物尿量的影响。加深对尿生成调节的理解。
[实验原理]
尿是血液流过肾单位时经过肾小球滤过，肾小管重吸收和分泌而形成的，凡对这些过程有影响的因素都可影响尿的生成。肾小球的滤过作用取决于肾小球的有效滤过压，其大小取决于肾小球毛细血管血压，血浆的胶体渗透压和肾小囊内压。影响肾小管重吸收作用主要是管内渗透压和肾小管上皮细胞的重吸收能力，后者又为多种激素所调节。
[实验对象]
兔
[实验药品]
20%氨基甲酸乙酯（或2%戊巴比妥钠溶液）、肝素生理盐水溶液（100 u/ml）、生理盐水、20%葡萄糖溶液、班氏试剂、1：10000去甲肾上腺素、垂体后叶激素、呋塞米（速尿）。
[仪器与设备]
计算机生物信号采集处理系统（或二道生理记录仪、电子刺激器）、压力换能器、保护电极、记滴器、恒温浴槽、哺乳动物手术器械一套、兔手术台、气管插管、膀胱导管（或输尿管导管）、动脉插管、注射器（1 ml、20 ml）及针头、烧杯、试管架及试管、酒精灯等。
[方法与步骤]
1.标本的制备
(1)实验兔在实验前应给予足够的菜和饮水。
(2)称重动物，耳缘静脉注射20%的氨基甲酸乙酯溶液（5 ml·kg^-1体重）进行麻醉，待动物麻醉后仰卧固定于手术台上。
(3)在颈部手术 ①暴露气管，施气管插管；②分离左侧颈总动脉，按常规将充满肝素生理盐水的动脉插管插入其内，通过血压换能器连至记录装置，描记血压。③分离右侧的迷走神经，穿线备用，用温生理盐水纱布覆盖创面。
(4)尿液的收集可选用膀胱导管法或输尿管插管法。
.①膀胱导尿法自耻骨联合上缘向上沿正中线作4 cm长皮肤切口，再沿腹白线剪开腹
壁及腹膜（勿伤腹腔脏器），找到膀胱，将膀胱向尾侧翻至体外（勿使肠管外露，以免血压下降）。再于膀胱底部找出两侧输尿管，认清两侧输尿管在膀胱开口的部位。小心地从两侧输尿管下方穿一丝线，将膀胱上翻，结扎膀胱颈部。然后，在膀胱顶部血管较少处作一荷包缝合，再在其中央剪一小口，插入膀胱导管，收紧缝线、结扎固定。膀胱导管的喇叭口应对着输尿管开口处并紧贴膀胱壁。膀胱导管的另一端通过橡皮导管和直管连接至记滴器，并在它们中间充满生理盐水。
②输尿管插管法沿膀胱找到并分离两侧输尿管，在靠近膀胱处穿线将它结扎；再在此结扎前约2厘米的近肾端穿一根线，在管壁剪一斜向肾侧的小切口，插入充满生理盐水的细塑料导尿管并用线扎住固定，此时可看到有尿滴滴出。再插入另一侧输尿导管。将两插管并在一起连至记滴器。手术完毕后，用温生理盐水纱布覆盖腹部切口。
2.仪器连接
①计算机生物信号采集处理系统：将压力换能器接在2通道，尿滴记录线接在记滴器上，通过计滴器与系统的4通道连结，描记尿的滴数。刺激电极与系统的刺激输出相连。
②二道生理记录仪、刺激器、记滴器：先将记滴电极连至生理、药理多用仪的记滴输入，再用外接线将生理、药理多用仪的记滴信号和时间标记信号输入二道生理记录仪的外接信号输入插座，由记录仪的两个标记描笔分别记录尿滴和时间间隔(10 s)；压力换能器的输出连至二道生理记录仪的上线记录血压；刺激电极连于刺激器输出。
手术和实验装置联接完成后，放开动脉夹，开动记滴器，记录血压及尿量，进行下列观察。
3.实验项目
(1)记录正常情况下每分钟尿分泌的滴数。
(2)耳缘静脉注射38℃的0.9%NaCl溶液15～20 ml，观察血压和尿量的变化。
(3)取尿液2滴至装有1 ml班氏试剂的试管中，在酒精灯上加热作尿糖定性实验。然后耳缘静脉注射38℃的20%葡萄糖溶液5 ml，观察尿量的变化。待尿量明显增多时，再取尿液2滴作尿糖定性试验。
(4)耳缘静脉注射去甲肾上腺素（1：10000）0.5 ml，观察血压和尿量的变化。
(5)结扎并切断右侧迷走神经，连续刺激迷走神经的外周端20～30 s，使血压降至6.67 kPa（50 mmHg）左右，观察血压和尿量的变化。
(6)耳缘静脉注射呋塞米（5 mg·kg^-1），观察血压和尿量的变化。
(7)耳缘静脉注射垂体后叶素1～2 U(0.2 ml），观察血压和尿量的变化。
[注意事项]
1.选择家兔体重在2.5-3.0kg左右，实验前给兔多喂菜叶，或用橡皮导尿管向兔胃内灌入40～50 ml清水，以增加基础尿量。
2.手术动作要轻揉，腹部切口不宜过大，以免造成损伤性闭尿。剪开腹壁避免伤及内脏。
3.因实验中要多次进行耳缘静脉注射，因此要注意保护好兔的耳缘静脉。应从耳缘静脉的远端开始注射，逐渐向耳根部推进。
4.输尿管插管时，注意避免插入管壁和周围的结缔组织中；插管要妥善固定，不能扭曲，否则会阻碍尿的排出。
5.实验顺序的安排是：在尿量增加的基础上进行减少尿生成的实验项目，在尿量少的基础上进行促进尿生成的实验项目。一项实验需在上一项实验作用消失，血压、尿量基本恢复正常水平时再开始。

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