[实验目的]
通过观察动物在整体情况下,各种理化刺激引起循环、呼吸、泌尿等功能的适应性改变,加深对机体在整体状态下的整合机制的认识。
[实验原理]
动物机体总是以整体的形式存在,不仅以整体的形式与外环境保持密切的联系,而且可通过神经-体液调节机制不断改变和协调各器官系统(如循环、呼吸和泌尿等系统)的活动,以适应内环境的变化,维持新陈代谢正常进行。
[实验对象]
健康成年家兔。
[实验药品]
20%氨基甲酸乙酯、0.5%肝素生理盐水、38℃生理盐水。1∶10000去甲肾上腺素、1∶10000乙酰胆碱、呋塞米(速尿)、垂体后叶素、20%葡萄糖溶液、生理盐水、3%乳酸、5% NaHCO3 、CO2气体、钠石灰。
[仪器与器械]
手术器械一套、兔手术台、动脉夹、注射器(1ml、5ml、50ml)、计算机生物信号采集处理系统(或二道生理记录仪2台、刺激器、计滴器)、刺激电极、压力换能器、张力换能器、气管插管、橡皮管,球囊、动脉插管、输尿管插管(或膀胱套管)、刻度试管、金属钩、铁支架、丝线。
[实验方法及步骤]
1.实验的准备
(1)麻醉固定:动物称重后,自耳缘静脉缓慢注入20%氨基甲酸乙酯溶液(5 ml·(kg体重)-1),麻醉后仰卧固定于兔手术台。
(2)颈部手术:①行常规气管插管术;②行右侧颈总动脉插管术,并连接压力换能器,记录血压。
(3)上腹部手术:上腹部剪毛,切开胸骨剑突部位的皮肤,沿腹白线切开长约2 cm的切口,小心分离、暴露剑突软骨及骨柄,用金冠剪剪断剑骨柄,将缚有长线的金属钩钩于剑突中间部位,线的另一端连张力换能器, 记录呼吸(见实验8.2)。
(4)下腹部手术:下腹部剪毛,沿耻骨上缘正中线切开皮肤约4cm,剪开腹壁(不要伤及腹腔内器官),在腹腔底部找出两侧输尿管,实施输尿管插管术(也可作膀胱插管,暴露膀胱行膀胱漏斗结扎术,见实验11.1)。
2.连接实验装置
分别将压力换能器、张力换能器和记滴器与计算机生物信号采集处理系统(或二道生理记录仪)相连,选定各信号输入的通道,调整好波宽、增益、刺激强度、时间常数等实验参数,调整动脉血压波形、呼吸波形和尿滴,以便获得良好的观察效果。
3.实验项目:
(1) 记录一段正常的动脉血压曲线、呼吸曲线和尿量。
(2) 吸入CO2气体: 将装有CO2的气囊(可用呼出气体)的管口对准气管插管,观察血压、呼吸及尿量的变化。
(3) 缺氧: 将气管插管的一侧管与装有钠石灰的广口瓶相连,广口瓶的另一开口与盛有一定量的空气气囊相连,此时动物呼出的CO2可被钠石灰吸收,随着呼吸的进行,气囊里的O2逐渐减少,可造成缺氧。观察血压、呼吸及尿量的变化。
(4) 改变血液的酸碱度:①由耳缘静脉较快的注入3% 乳酸2 ml观察H 增多时对血压、呼吸及尿量的影响。②由耳缘静脉较快的注入5% NaHCO3 6 ml观察血压、呼吸及尿量的变化。
(5) 夹闭颈总动脉:待血压稳定后,用动脉夹夹住左侧颈总动脉,观察血压、呼吸及尿量的变化。出现明显变化后去除夹闭。
(6) 电刺激迷走神经和减压神经:将保护电极与刺激输出线(通道)连结,待血压恢复后,分别将右侧迷走神经、减压神经轻轻搭在保护电极上,选择刺激强度6V,刺激频率40~50 次·s-1,刺激15~20 s,观察血压、呼吸及尿量的变化。
(7) 静脉注射生理盐水:由耳缘静脉快速注射38℃生理盐水30 ml,观察血压、呼吸及尿量的变化。
(8) 静脉注射利尿药:待血压恢复后,由耳缘静脉注射速尿0.5 ml,观察血压、呼吸及尿量的变化。
(9) 静脉注射垂体后叶素:在利尿药的背景上,由耳缘静脉缓慢注射垂体后叶素2 U,观察血压、呼吸及尿量的变化。
(10) 静脉注射去甲肾上腺素(NE): 待血压恢复后,由耳缘静脉注射1∶10000去甲肾上腺素0.15 ml·kg-1,观察血压、呼吸及尿量的变化。
(11) 静脉注射乙酰胆碱(ACh): 待血压恢复后,由耳缘静脉注射1∶10000乙酰胆碱0.15 ml·kg-1,观察血压、呼吸及尿量的变化。
(12) 静脉注射葡萄糖:待血压恢复后,由耳缘静脉注射20%葡萄糖5 ml,观察血压、呼吸及尿量的变化。
(13) 动脉放血:待血压恢复后,调节三通管使动脉插管与50ml注射器(内有肝素)相通,放血50 ml (放血后立即用肝素生理盐水将插管内血液冲回兔体内,以防凝血),观察血压、呼吸及尿量的变化。
(14) 回输血液:于放血后5 min,经动脉插管将放出的血液全部回输入兔体内,观察血压、呼吸及尿量的变化。
[实验结果]
[注意事项]
1.在麻醉时,缓慢将药物推入,防止动物麻醉过量致死。
2.剪断胸骨柄时,不能剪得过深,以免伤及其下附着的膈肌。
3.作输尿管插管术时,要防止插入管壁肌层之间。
4.术后要用湿纱布覆盖手术切口,以防水分流失。
5.在前一项实验的作用基本消失后,再做下一步实验。 上一篇:鱼类渗透压调节 下一篇:肾小球血流的观察