温度对鱼类耗氧量的影响

[实验目的]
　　了解外界水温对鱼类耗氧量的影响,掌握溶氧量测定的基本方法
[实验原理]
　　在一个流水系统中,当不同温度的水以一定的速度流过呼吸室时,由于鱼类的呼吸作用,消耗了水中的溶解氧。通过测定呼吸室进水口和出水口溶解氧和水流量，即可计算出某一温度下鱼的耗氧量。
本实验采用温克勒（Winkler）滴定法测定水中的溶氧量。
[实验对象]
　　鯽鱼、金鱼、罗非鱼或其它鱼均可。
[实验药品]
　　①MnSO4溶液:称取480 g硫酸锰(MnSO₄·4H₂O或364 gMnSO₄·H₂O)溶于水,用水稀释至1000 ml。
　　②碱性碘化钾溶液: 称取500 g分析纯NaOH溶解于300～400 ml水中,另取150 gKI溶于200 ml水中,待NaOH溶液冷却后,将两溶液混合,用水稀释至1000 ml。此溶液不能有碳酸盐存在，如果有沉淀需先过滤。贮于棕色瓶中。
　　③浓硫酸（比重1.83～1.84）
　　④Na₂S₂O₃溶液: 称取6.2 g硫代硫酸钠(Na₂S₂O₃·5H₂O)溶于煮沸放冷的水中,加入0.2 g Na₂CO₃,用水稀释至1000 ml。贮于棕色瓶中，使用前用0.0250 mol·L-1重铬酸钾(K₂Cr₂O₇)标准溶液标定※。
　　⑤1%淀粉溶液：取2 g淀粉，先加少量水调成糊状，再加入沸水至200 ml，冷却后加入0.1 g水杨酸或0.4 g氯化锌防腐。
[仪器与器械]
　　酸式滴定管、滴定架、250 ml有塞广口瓶、250 ml锥形瓶、移液管、水槽或水族箱、鱼类呼吸室（可是塑料盒或广口瓶或带胶塞的直径较大的塑料管制成）。
[实验方法与步骤]
　　1.仪器的连结
　　测定鱼类耗氧量的实验装置可分为流水装置和静水装置。图12.2-1所示即是一种静水装置。在一个恒温的水槽(或水族箱)中,放一个鱼类呼吸室。 事先测定各样品瓶盛满水并塞紧瓶塞时的实际水容积，做好记录。
　　调整各实验组水槽温度，使其分别恒温在20℃、25℃、30℃。将鱼称重后放入呼吸室，用垫板升、降样品瓶的位置以调节出水的流速。水的流速通过收集一定时间内溢出样品瓶的水量来测定，（用量筒测定）流速约为1 ml·(min·g鱼体重)-1。该实验装置简便，一般实验室均可达到。但该实验装置测定鱼类的耗氧量一般要求在1 h内能完成所有样品的采集。因为当水槽中的水位下降到一定水平时水的流速会变慢，需要重新调整流速。作为学生上课，在短时间内熟悉整个实验过程还是可行的。若进行科学研究则一般采用流水式装置系统（后述）
　　2.实验项目
　　（1）取水样： 经过约1小时，待呼吸室和样品瓶中的氧到达平衡后，开始从呼吸室出口处取水，作为出水口的水样。取水样时，应将连通呼吸室的导管插入瓶底，并令水外溢约2～3瓶的体积；提出导管时应边注入水，边往上提，立即盖紧瓶塞。
　　（2）同时取水槽（或水族箱）中的水样作为进水口的水样。
　　（3）溶解氧的固定：将移液管插入水样瓶液面下方约0.5cm，向水样中加入1 ml MnSO₄溶液、2 ml碱性KI溶液（各移液管应专用），立即盖好瓶塞，颠倒混合，静置3～4 min；
　　（4）酸化，析出碘： 待瓶中沉淀下沉到瓶的1/2高度时,小心打开瓶塞，立即再用移液管插入液面约0.5 cm，加入2 ml H₂SO₄ 。小心盖好瓶塞，来回剧烈摇动水样瓶，使其充分混合，直至沉淀全部溶解，并有I析出。放在暗处5 min。