各种组织特殊染色法—弹性纤维染色
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  • 各种组织特殊染色法—弹性纤维染色

  • 点击:    作者:   来源: 日期:2007-04-09    本站论坛

特点:①操作简单,易掌握。
②染色的时间短,适宜于临床活检。
注意事项:
①苏木素为储存液,但每次以新配为佳,
②混合后的染液须当次用完,不能保存,
③分化时应于镜下控制,以免过染或淡染。
(三)弹性纤维染色的临床应用
1. 用于区别正常的动脉和静脉以及观察动脉有病变时血管壁各层的情况,如动脉粥样硬化时的各类变化。
2. 用于区别观察各种疾病对弹性纤维的影响及变化,如原发性或继发性高血压可见主动脉弹力纤维增生,老年弹力纤维增多症。心内膜弹力纤维增生症常都可见到弹力纤维断裂,梅毒性主动脉炎和皮肤的环状肉芽肿,动脉粥样硬化均可见到裂解,崩解的弹力纤维。
3. 用于弹力纤维性假黄瘤的诊断。
该病镜下见真皮中下部结缔组织变性,呈团块状或条索状,弱嗜碱性用弹力纤维染色法可以鉴别。
(四)对染好弹力纤维的总结和体会
1.这种方法对固定液没有特殊要求,一般福尔马林固定液即可,但时间不宜过长,过长可影响染色。另外,不要用含有铬酸盐如Zonker氏固定液固定。
2.认真配制好各种试剂。
试剂配制的好坏,直接关系到染色的成败,因此要获得好的染色结果,就必须先配制好试剂,每一种试剂都必须认真仔细操作。在这些方法中,有的可配为储存液,有的则应在临用前配制。应注意的是,在配制Weigert氏雷琐辛品红时,可产生大量的气体,因此要用较大的容器来配制。
3.切片的氧化,漂白。
上述的四种方法,作者都作了大量的对照。取同一病例,分为甲乙两组,甲组的切片的颜色比乙组的鲜艳,这是为什么呢?我们都知道,所有的组织经甲醛固定后,都形成了醛键,这些醛键的存在,影响了组织跟染液发色基团的更好结合。为了使组织能更有效的显示出来,利用某些试剂进行氧化,把这些醛键打开,然后再对切片进行漂白,使切片不含有其它的杂质,着色更纯正,实验证明效果很好。
四 横纹肌染色
(一)横纹肌的一般结构
横纹肌又称骨骼肌,它的肌纤维细长,呈圆柱状并具有横纹肌,直径约10-100um,长度长短不一,长的可达4cm以上,短的只有数mm,一条肌纤维的细胞核最多的可达百余个,分布在纤维的周缘,最近肌膜,细胞核呈扁椭圆形,核附近有小的高尔基复合体,细胞质内有大量与肌纤维长轴平行的肌原纤维,肌原纤维之间有肌质网,线粒体,脂滴,糖元等。
(二)横纹肌的超微结构
1.肌原纤维,每一条肌原纤维有许多明带和暗带互相间隔所构成的横纹。每一条肌原纤维有1-2千条平行的肌丝集束而成,肌丝分为粗肌丝和细肌丝。
①粗肌丝:由许多豆芽状的肌蛋白(ayosin)集合而成。
②细肌丝:由肌动蛋白(action),原肌球蛋白(tropamyosin)和肌原蛋白(troponin)构成。
2. 横小管,在每条肌原纤维的周围,在每一暗带与明带交界处,都缠绕着一条细管,称横小管。
3. 肌质网在肌原纤维的周围,于相邻两条横小管之间,有网状的肌质网。



(三).横纹肌的染色方法:
1.PTAH法
2.Masson氏液染色法
3.Uan Gieson氏法
1.磷钨酸苏木素染色法
(phsphotungstic atid,hamatoxy lin,PTAH)
1试剂的配制:
磷钨酸苏木素染液
苏木素 0.1g
蒸馏水 100ml
磷钨酸 2g
取一烧杯先将蒸馏水加温,再加入苏木素,加以搅拌,待溶解后才能成熟,才可使用。
2.操作方法:
⑴切片脱蜡至水,
⑵于Zenken氏液中静放一夜,
⑶流水冲洗,
⑷用0.5%碘酒处理10min,
⑸水洗,
⑹5%硫代硫酸钠脱碘5min,
⑺水洗,
⑻高锰酸钾液处理5min,
⑼水洗
⑽2%的草酸液漂白2min,
⑾流水冲洗3min,
⑿入磷钨酸苏木素液染24-48h,
⒀95%酒精快速分化,
⒁脱水透明,封固。
结果:横纹肌纤维,纤维素,胞核,核仁和神经胶原纤维等呈蓝色,胶原纤维,网状纤维,软骨基质呈棕红色,弹力纤维呈紫色。
(四)临床应用:
①横纹肌肉瘤是较常见而且恶性度很高的肉瘤,形态较多,成分复杂,与纤维肉瘤的腺泡状软组织肉瘤及多型性脂肪瘤相混淆,在HE的情况下,它们有许多共同之处,必须靠特殊染色和免疫组化染色。
②横纹肌纤维的脂肪变性。在HE染色时,肌纤维纹理显示不清楚,部分呈空泡状改变。此时的切片与水泡样变性,浊肿时的病变不好区别。
③肌纤维的变性,坏死及其坏死后的修复过程,跟胶原纤维的坏死的HE切片不好区别,PTAH对区别这类切片有帮助。
④用于恶性Mullerican混合瘤的鉴别诊断,该肿瘤镜下结构复杂,典型的表现是癌和肉瘤样成分混合存在,当发现肿瘤细胞有横纹或免疫标记证实骨骼肌标记物阳性者,即可此病。


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