5%四硼酸钠水溶液 2.5 ml
3%乌铬托品水溶液 12.5 ml
蒸馏水 12.5 ml
先将蒸馏水与乌铬托品水溶液混合在一起,再加入硝酸银水溶液,此时将呈现乳白色,搅拌后即可消失,加入四硼酸钠水溶液后,即可使用。
注意事项:
1.该法的主要原理是利用铬酸氧化真菌菌壁的多糖化合物而暴露醛基,醛基将六胺银液中的银还原,成为黑色的金属银。如此,氧化切片成为类键,氧化切片可以有几种不同的方法:
①加热法(上述的方法)
②延时氧化法:即将氧化液稀释,配成2%或5%,然后于室温中氧化过夜。
③微波加热氧化法:将氧化液连同切片于微波炉中加热氧化10-20分钟。
2.浸染切片也可根据不同的种类,采取不同的方法,如加热法,延时法或微波加热法。但浸染程度是否足够,应在显微镜下观察。
(5)六氨银法改良法显示组织胞浆菌
①切片脱蜡至水
②2%重铬酸钾硫酸液氧化切片24小时。可用微波辐射5-10分钟或者超声波20分钟。
③水洗,蒸馏水洗。
④于六氨银液(见前法)中在60℃烤箱中浸染60分钟。可用微波辐射1分钟,或者超声波10-20分钟。
⑤水洗。
⑥0.5%淡绿水溶液或伊红作对比色。
⑦用酒精洗去多余的染色。
⑧脱水,透明,封固。
结果:组织胞浆菌呈黑色,菌体中央为空白区,于吞噬细胞内,呈现重叠拥挤,状如桑椹。背景为淡绿色或淡红色,视所应用的对比染色而定。
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