各种组织特殊染色法—细菌染色法

细菌是一类具有细胞壁的单细胞微生物。它形体微小，结构简单，无典型的细胞核，只有核质，无核膜和模仁不进行有丝分裂，除核蛋白体外无其他细胞器，在生物学分类上属于原生生物界中的原核细胞型.
（一）细菌的形态
细菌的种类很多，形态各异，但归纳起来，基本上只有三种形状，即球形、杆形和螺形。
（二）细菌的基本结构
细菌由细胞壁、细胞膜、细胞浆和核质核成。细胞壁的主要成分为肽聚糖；细胞膜的主要成分为磷脂，细胞浆中的主要成分是水、蛋白质、核酸和脂类物；核质的主要成分为DNA。在病理技术中，与病理技术相关的是细菌的细胞壁，细胞壁上结构的变化是将其显示出来的关键。
（三）细菌的特殊结构
细菌除了上述的基本结构以外，能够显示出各种细菌的特性和形状的是他的特殊结构，根据细菌的特殊结构，就可以辨认出不同种类的细菌素。它的特殊结构是鞭膜、鞭毛、菌毛、芽胞[9]。
（四）Warthin-Starry法显示幽门弯曲菌
（1）操作方法：
①切片脱蜡至水。
②醋酸盐缓冲液冲洗切片2次，1分钟/次。
③入1%硝酸银水溶液（预热达60℃）处理切片60分钟，在烤箱中进行。
④于显影液中（60℃烤箱）3分钟，镜下控制，如果没达到要求，还可继续延长时间，直到合适为止。
⑤ 取出切片，用60℃热水洗切片。
⑥缓冲液洗切片。
⑦脱水，透明，封固。
结果：胃腺上皮或腺腔内表面，胃幽门弯曲菌显示棕黄至棕黑色，HP可散在出现，也可成团出现，其余组织及背景显示棕黄色。
（2）甲苯胺蓝染色法
①切片脱腊至水。
②蒸馏水浸洗3次。
③0.1%甲苯胺蓝液浸染10min。
④水洗，洗去多余染液。
⑤各级酒精脱水。
⑥二甲苯透明，中性树胶封固。
结果：在胃粘膜腺上皮表面，腺腔内均可见到幽并肩战斗让螺杆菌（HP），有的呈弯曲杆状或逗点状，HP可散在出现，也可成团聚集出现，这要根据不同病例而异。
试剂的配制：称取0.1g甲苯胺蓝，溶于100ml 0.1M醋酸盐缓冲液中，置室温5天后，即可使用染液于室温下可保存3个月，若放于4℃冰箱则可保存半年左右，但该液的染色效果在早期为最佳，若染液存放时间较长，则染色偏淡，应适应延长染色时间。
试剂配制：
醋酸缓冲液（PH3.6）
醋酸钠 1.64g
醋 酸 2.5ml
蒸馏水 凑足200ml
2.1%硝酸银液
硝酸银 1g
醋酸盐缓冲液（PH3.6）凑足100ml