| （一）Macchiavello氏改良法显示SARS病毒包涵体
1.切片脱蜡至水。
2.0.5%高锰酸钾氧化切片5分钟。
3.水洗。
4.2%草酸水溶液漂白切片2分钟。
5.水洗。
6.0.25%淡绿水溶液或伊红作对比染色。
7.水洗。
8.0.25%柠檬酸水溶液分化切片20秒,于显微镜下控制,水洗。
9.1%甲基蓝作对比染色30秒。
10.水洗。
11.风干切片。
12.二甲苯透明，中性树胶封固。
13.结果：SARS病毒包涵体于肺组织细胞浆内，呈鲜红色，细胞核呈蓝色。纤维蛋白渗出物呈粉红色，结缔组织呈蓝色。（图）
（二）.Giemsa法显示多种病毒包涵体。
1.切片脱蜡至水，蒸馏水洗。
2.浸入0.01M磷酸盐溶液(PBS)PH7.6中,换洗3次,3分钟/次。
3. 浸染于PH7.6的Giemsa染液中过夜。
4.PBS冲洗15分钟。
5.0.01%柠檬酸水溶液分化，于镜下控制。
6. 蒸馏水洗。
7.吸水纸吸干或风干切片。
8.丙酮脱水，1-2分钟。
9.入1：1丙酮和二甲苯1-2分钟。
10.二甲苯透明，中性树胶封固。
结果：SARS病毒包涵体于肺细胞胞浆中呈现鲜红色；合胞病毒，巨细胞病毒包涵体于肺组织的细胞核内，在没有形成包涵体前呈鲜红色，形成包涵体后呈深紫色至蓝色。红血细胞显示绿色。（图）
试剂的配制：
Giemsa粉 2.4g
甲醇 50ml
甘油 50ml
先将Giemsa粉溶于甲醇中，然后加入甘油，混合后放入50℃左右的烤箱中加入热助其彻底溶解。然后放于4℃冰箱中备用。临用时，取0.01PBS40mlGiemsa原液，即可使用。
Giemsa法显示海蓝组织细胞
I 试剂的配制
取0.01M的PBS（pH7.6）40ml，加入Giemsa原液1ml混合均匀后即可使用。
II 操作方案
1．常规石蜡切片脱蜡至水
2．0.5%高锰酸钾水溶液氧化切片5分钟
3．自来水洗。
4．2%草酸水溶液处理切片1-2分钟。
5．自来水洗PBS洗。
6．浸染于上述稀释液，在室温中染12-24小时。
7．用正丁醇分化切片，于镜下控制至合适为止。
8．正丁醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
结果：海蓝组织细胞胞浆可见到充满海蓝色小空泡，有的可见到海蓝色子颗粒。
注意事项：
1.配Giemsa浸染液时，可根据不同的病毒包涵体来配制。如染胞浆内的包涵体，PH可用5.0，7.6，如果染核内的病毒包涵体PH可用7.6或9.5,即可获得满意的结果。
2.应用柠檬酸分化切片时，浓度应特别低，如果浓度较高，很容易将着染的颜色除去，因为浸染液的浓度很稀。
3.切片进入丙酮脱水时，可将着染的紫色除去，留下绿色，因而切片的最后结果有绿色的显示。
4.切片在丙酮脱水后进入下一步丙酮和二甲苯时，直接进入，不要控干切片，切片如在空气中暴露过长时间，可吸收大量水分，导致切片不能透明。
（三）伊红和甲基蓝显示合胞病毒和巨细胞病毒包涵体。
1.切片脱蜡至水，蒸馏水洗。
2.浸入PBS3次，3分钟/次。
3.浸入伊红和甲基蓝浸染液中浸染过夜。
4.0.01MPBS冲洗10-15分钟。
5.0.01柠檬酸水溶液分化切片，镜下控制。
6.风干，二甲苯透明，中性树胶封固。
结果：合胞病毒和巨细胞病毒包涵体着染深蓝色或绿色。于细胞核内，胶原纤维着染浅蓝绿色。SARS病毒包涵体不着色。
小结
病毒非常微小，最小的约为20nm左右。因而用一般的光学显微镜是无法观察到它的，从病理技术的角度，也就无法对它们进行鉴定了。但是当它们进入机体，形成包涵体后，就可以根据它们的所在部位和形态，应用不同的特殊素对它们进行显示和确定。当然鉴定病毒主要还要靠电子显微镜和其它生化手段。如鉴定SARS病毒时，于电镜下可见部分扩张的滑面内池内有群集的，大小较一致的病毒颗粒，表面有细小的花冠状微粒，病毒颗粒大小约为70-90nm。上述所应用的几种不同的特殊染色方法，对已形成的几种病毒包涵体的显示，经反复实验证明，是比较好的方法。
病毒属于一类非细胞结构，无自主繁殖能力的微生物，它必须依所侵蚀所寄宿的宿主细胞提供高分子合成装置和能量，它的基本结构是由核酸和蛋白质构成，当它们被融合在一起形成一小体后，方能在光学显微镜下被观察到，这些小体依其属性存在于细胞的不同部位，这些小体通常被称为病毒包涵体。
病毒种类很多，由它侵蚀机体并形成包涵体的种类也有不同，经研究发现由两类物质所构成一类是由DNA所构成属于碱性，在HE染色过程时呈深蓝色，位于细胞核内，包涵体的四周为空白区，造成这种现象的主要原因是病毒为了保存自己而形成的，病毒包涵体形成需要四个阶段：一是侵入阶段，病毒通过吸附，穿入等手段进入细胞核，二是大量繁殖，复制并完全控制细胞核阶段，整个细胞核均匀一致的颗粒所覆盖；三是收缩防守，构筑堡垒的阶段，分散于整个细胞核中的病毒逐步收缩集中建立起自身的桥头堡，并将细胞核逐步挖空，此时细胞中的骨架被损坏，细胞逐步变形；四是包涵体完整成形阶段，此时细胞核中间有一独立的圆形小体，四周被挖空，跟细胞的其他部分没有联系，形如孤岛，由于它的构造特殊，与外界失去联系，因而治疗此类病毒的药物无法达到，导致药物治疗效果不佳。合胞病毒和巨细胞病毒等属于这一类病毒，它们由DNA构成，应用Macchiavello氏改良法显示其包涵体效果不好，应用Giemsa在PH7.6和9.5时效果好，应用伊红和甲基蓝显示效果也很不错。另一类病毒包涵体则由RNA所构成，呈嗜酸性，位于细胞浆中，在HE染色中包涵体呈淡粉红色，SARS病毒等属于这一类。它们的包涵体的形成也要经历几个阶段，即进入构筑堡垒和包涵体形成三个阶段。当它们以吸附等方式进入机体后，于细胞浆寄宿下来，为了不暴露自身和保护自己，除借用细胞中的装置复制病毒外，还分泌毒素，将周围的蛋白质融合，形成包涵体。至于为什么有的病毒进入细胞核有的病毒进入细胞浆的原因，目前尚不清楚。
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