聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳分离血清蛋白
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聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳分离血清蛋白

点击:   作者:   来源:  时间: 2007-04-09  本站论坛
电泳中,集浓缩,分子筛和电荷效应为一体,因而较醋酸纤维薄膜电泳、琼脂糖电泳等有更高的分辨率。
[应用意义]
PAGE应用范围广,可用于蛋白质、酶、核酸等生物分子的分离、定性定量及少量的制备,还可测定分子量、等电点等。
[注意事项]
1、贮液放冰箱中一般可保持1—2个月,但3号贮液只能保存一周。如有不溶物可过滤。
2、Acr和Bis对神经系统有毒害,使用时要小心,注意勿与皮肤接触。但聚合后的凝胶对人体无害。
3、电泳时的电流最好不超过5mA/管,以免产生过多热量。室温高时应进行冷却或冷库内进行电泳
4、本实验需时间较长。在一次实验中可安排到脱色一步,再于下一次实验中观察脱色后的胶条并绘图。
5、在碱性条件下,凝胶易聚合,其聚合速度与Ap浓度平方根成正比,一般在室温下,pH8.8时,7.5%丙烯酰胺溶液30min完成聚合作用,在pH4.3时聚合速度很低,约需90min才能聚合,此外应选择高纯度的Acr和Bis。杂质。某些金属离子、低温和氧分子能延长或阻止碳链的延长与聚合作用。
[思考题]


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