| 病理制片程序 | | 点击： 作者： 来源： 时间： 2007-04-09 本站论坛 |
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⑤切片无水化除了用电吹风外，还可用火烧，切片用90%酒精洗后，取出切片，用火轻烧，也可达到切片的无水化。火对切片有损害吗？否，经实验证明，切片火烧时最高温度为80℃左右，对切片没有影响。用火烧时必须彻底清除二甲苯，因为二甲苯燃烧时可产生浓烟，如果存留于切片，将会影响观察。当然，用火时应特别注意防火，因为病理技术室的大部分试剂都为易燃品。
⑥苏木素染液中的最佳染色时间，确切地回答还是比较困难的，因为各种组织都有不同的染色时间，核的染色时间从30sec至15min不等。对于核的染色，为了充分地显示各种核染色质，一定要过染，尤其对于初学者来说，更是如此。
⑦苏木素染液有多种，常规应用的通常为明矾苏木素，明矾苏木素又有Harris苏木素，Mayer’s苏木素，和Ehrish苏木素等。
⑧盐酸酒精分化切片，浓度有0.25%,0.5%和1%根据各人的情况而使用。这一步主要是将过染的颜色及不该染的染色去除掉，这一步要掌握得当，必须靠经验，核的染色清楚与否靠分化这一招，分化过度，核染色淡，分化不足，核染色质一团，分不清。初学者应于显微镜下控制分化程度。
⑨水洗蓝化，也可用温热水来促使切片蓝化，可用氨水，碳酸锂等化学药品来促蓝，虽然如此，自来水冲洗蓝化切片是最好的，这对于切片的保存较为有利。
⑩ 伊红酒精浓度有0.25%,0.5%和1%之分，根据各单位的情况而定。切片一放入伊红染液，即可马上着色，但是，要染好切片，必须染够染足时间。⑾分化伊红须用浓度较高的酒精，以往伊红染色以后，用低浓度的酒精分化，洗去多余的染液，实践中发现低浓度的酒精褪色能力特强，如果掌握不好，染上的伊红，便会被褪去大部分。改用较高浓度酒精后，这种现象便不会出现。
⑿作为切片脱水剂的酒精，要经常更换，尤其是无水酒精，更要保持其无水性。否则切片脱水不干净，含有水份就会褪色。切片取出后，不能令其干涸，即刻进行下一步。
⒀碳酸二甲苯，对于南方地区来说，是一种很有用的试剂，碳酸吸水性强，用它可加强脱水，它是二甲苯与酒精之间的缓冲剂，切片经此试剂后更加透明和光亮。有人认为碳酸为一种弱酸，切片用它后可能会褪色，这种担心是多余的，切片褪色，最主要是切片本身含有水份所导致。根据我们的实验，82年的切片经碳酸处理后，17年来颜色仍然保持鲜艳就足以说明。
⒁二甲苯须换三次，以确保切片的透明度，这对于切片的观察和保存，都大有好处。
⒂封片时要做到：切片从二甲苯取出后，不使切片干涸。如果干涸，由于空气潮湿，封片时就保证不了切片的无水。如果切片上保留着一定量的二甲苯，二甲苯的特性不溶于水，它的存在使切片与空气隔开，切片无法跟潮湿空气接触，就可保证切片的无水，这时及时滴上中性树胶，切片就能完好地封好。
⒃封片用的中性树胶，不能过稠，也不能过稀，过稠胶难以伸展开，并容易产生气泡，影响封片的速度。过稀是因胶中含过多的二甲苯，封完切片后，胶一收缩及二甲苯挥发，切片就不能被完全封盖上，这都影响切片的质量。
2.卧色自动染色机染色方法及步骤
自动染色机应用于病理切片的染色是近几年的事情，目前国内仅有少数单位拥有自动染色机，南方医院自1997年引进英国Shandon公司研制的Varicstain TM xy多程序全自动染色机以来，已完成活检HE染色和脱落细胞染色。
应用该机染片的优点
①该机全全部由电脑控制，可设置20种操作程序，任意设定各种时间。
②有21个装试剂的罐，其中2个为自来水冲洗罐，切片前水洗和苏木素染色后水洗以及盐酸分化时的水洗，都在这两个罐中进行。
③该机配有多种不同的染色架，根据工作量的不同，自行选择，其中最大容量为6张切片。
④该机设置自动操作手臂，可在设置的范围内朝不同的方向和位置到达任何一个染色罐，朝上下活动。
⑤染色罐可多套配备，作多种染色，如组织学的HE染色，细胞学的巴氏染色等。
根据我们的应用情况，现将我们的染色程序列表如下：
自动染色机工作程序一览表
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