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  • 病理制片程序

  • 点击:    作者:   来源: 日期:2007-04-09    本站论坛

(5)全密闭柜式自动脱水机脱水法(加温至40度)。
(6)全密闭柜式自动脱水机脱水法(真空负压)。
注:(5)、(6)法详细步骤同(4)法。
(7)全密闭柜式自动脱水机周末脱水法。
1.10%缓冲福尔马林20小时
2.90%酒精20小时。
3.95%酒精5小时。
4.95%酒精5小时。
5.95%酒精3小时。
6.100%酒精3小时。
7.100%酒精1小时。
8.100%酒精1小时。
9.二甲苯40min。
10.二甲苯40 min。
11.石蜡(1)1小时。
12.石蜡(2)1小时。(共61小时20分钟)
注:上述的临床程序都是以当天17:00钟取材完毕后所设定的时间,17:00—第二天的8:00,刚好是15个小时,要想在8:00上班时包埋组织块,就必需设定准确的时间,否则将会延误其它的时间,还有其它的如“五一”程序、“十一”程序和“春节”程序等,这些要根据休假的具体日期来确定每个步骤的时间。

 

 


 


(四)组织块包埋
随着科技的发展,组织块的包埋由简单的人工包埋转向用机器的半自动包埋。
(1)石蜡包埋机包埋法:
1、打开电源总开关,让包埋机处于工作状态。
2、调高温度,让包埋蜡温至65度左右。
3、打开冷冻台。
4、取出包埋模型,由脚踩踏或手控出蜡制,注入少量的石蜡后,挟入组织块,小的多块组织应放在一起,大块组织应压平,管状和皮肤组织应竖起来包埋,然后再压上包埋盒,包埋盒上再注入少量石蜡,包埋完后,将其置于冷冻台上,旁边备有一盒冷水,当冷冻台上的包埋块表面出现凝结时,迅速将它放入水中,然后取出蜡块,修削去周边的余蜡,按顺序排列好于4°C冰箱或冰格中冻起来备用。
(2)传统包埋法
1、将包埋框合成模型槽,注入石蜡。
2、打开组织块脱水盒,取出组织块,把平整的一面朝下,用镊子轻压,保持在一平面上。
3、每包埋完一块组织块,即将标签附上,以防出错或张冠李戴。
(3)组织包埋时的注意事项
1、传统包埋使用的镊子、包埋框,都必须放于40°C的恒温箱内,否则在没有暖气设备的冬天,熔化的石蜡遇到冰冷的器械回马上凝固,影响包埋。
2、传统包埋法使用的包埋框有多种,如铜和铝制品,,但以铜的为优,因铜的散热较快。
3、包埋的石蜡温度不宜过高,否则注入模型时,会四处溢流。
4、组织块本身的蜡不能凝固,如果凝固了,应放回重新加温,使其熔化,否则会影响切片,或整块崩出,破坏组织块。
5、包埋完后,应待蜡块完全凝固,方可放入水中,否则未凝固石蜡会被水挤走,漂浮于水面,造成包埋块蜡块的缺损。
6、小的多块的组织应包埋在一起在一水平面上,否则切片美观度不好,深浅不一的包埋会使有的切上,有的切不上或被修削去。
(五)蜡块的修切
不管是组织包埋机包埋的蜡块也好,还是传统法包埋的蜡块,切片前都需要很好的修切,才能更适合于切片。前者包埋的蜡块,包埋盒周边的石蜡,一定要去除掉,否则切片时,切片机上的持蜡器,将无法将其夹上,影响切片中间的部分,视组织的大小而确定是否需要修切,比如组织小米粒大小,这时应将周边多余的石蜡削去,按要求组织块周边的余蜡留有0.5CM即可,削去余蜡后,对于细小的组织,一张玻片可以多裱上几个组织块,对于疾病的观察大有好处。削去余蜡的另一个好处是延长切片刀的使用寿命,保证一把刀(一次性刀片)多切一些蜡块,因为余蜡的存在,在切片时,增加了刀口的磨擦,使刀口容易钝化。传统包埋法的蜡块,如为原始的包埋框所包埋的蜡块,在分切蜡块时,应特别小心,以防损坏分切的蜡块,造成切片的困难或难以形成连续切片(组织周边余蜡存留太小或没有)。目前大多数使用的是包埋盒,但包埋盒边上多余的石蜡也要修切去,否则妨碍蜡块上机切片。
(六) 石蜡切片。
组织块经过一系列的处理后,便准备切片,切片是检查验证前面系列处理程序是否合适,如果不合适,便可在切片时显示出来,比如组织脱水不好,组织表面将出现白色状,切片肯定不好;如果浸蜡不彻底,切片也不能切出来;如果组织脱水或浸蜡过度,切片时呈粉沫状或者呈波浪状。总之切片是个关卡,任何虚假或马虎都行不通。
切片时必须具备的工具有:
(1)石蜡切片机,目前,国内外常规使用的切片机有两种型号,它们是:
1、轮转式石蜡切片机,根据不同的情况,根据使用的习惯性来确定使用的机型,但据我所知,目前国内使用的机型,绝大部分是这种型号,这种机型,购买时只要选购好机子,使用起来就能得心应手,操作便利,换切蜡块快速,可制作连续切片。尤其是教学片,有更大的好处。
2、平推式切片机(轨道式)这种机子虽然也有它的优点,但从目前国内使用的单位统计,是占很少一部分,这种机型,单一切片,比较费力。
(2)切片烘烤箱,这种箱子可以自做,也有市售。
1、市售切片烘烤箱,该箱配有裱片用的温水控制部分,另一半为切片的烘烤部分,温度可进行调节,范围在0—100度间,边切片边烤片,这是最为理想的手段,其好处是,如果裱片时,有个别小部没裱好,发生皱折,及时的烘烤可将其烤平。另者,当切完最后一张时,前面的已烘烤差不多了,不用再费多少时间就能烤好切片。

 

 


 


2、自做烘烤箱,这根据各单位的情况进行制作,可以制作一个木箱,上面用铝板制成,在前部挖一个口子,刚好放进一个铝制饭盒,这个可作为裱片用,内将四个40—60W灯泡,外装开关控制,这便是一个烘烤箱。
(3)小镊子,小驼毛笔,切片刀或一次性刀片,玻片等。小镊子最好选用眼科用的弯小镊子,这对于挟取微薄的切片较有用,如果用大镊子很容易弄破切片,选用的毛笔以驼毛笔为好,因为这种笔柔软,不易弄破切片。切片刀最好选用一次性刀片,这种刀片好处有不用磨,节省人力和物力;如果刀片出现缺口,可另更换刀口,直至丢弃,而大的切片刀就不可能这样使用,如果刀有切口,就要将刀口磨去,磨去刀口是很费时的。
(4)切片。装上切片刀,装上蜡块,修平切面,如果没有特定标志,原则上是暴露组织的最大切面,定好切片的厚度,一般切片在4-5um。肾穿切片一般厚度在3um以下,切片时,注意力要集中,认真挑选佳片,切片完毕,应注意保养切片机,使之处于良好状态。保养时,滑动面要滴上油,以利滑动及旋转自如,还有防锈作用。切片完后,除去残留蜡,除去切片刀,先用湿布擦去余蜡,继用干布擦干,再用油布擦一遍,最后用罩盖好切片机,以防灰尘脏物落于切片机上,影响机器的滑动灵活性。除了切片机要保养外,如为切片刀,必须保养,切片刀要经常磨,保持锋利的刀口,如果发现切片刀有刀口,要想办法除去,每次用完刀后,用布擦干净,再用油布擦,以防刀口生锈,影响切片。

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