一、果蝇的概述
果蝇( fruit fly )是双翅目( Diptera )昆虫,属果蝇属( genus Drosophila ),约有 2500 个种。通常用作遗传学实验材料的是黑腹果蝇( Drosophila melanogaster )。它的生活史从受精卵开始,经历幼虫 ( 一至三龄 ) 、蛹和成虫阶段,因此是一个完全变态的过程。
用果蝇作为实验材料有许多优点:
1. 饲养容易。在常温下,以玉米粉等作饲料就可以生长,繁殖。
2. 生长迅速。十二天左右就可完成一个世代,每个受精的雌蝇可产卵 400 ~ 500 个,因此在短时间内就可获得大量的子代,便于遗传学分析。
3. 染色体数少。只有 4 对。
4. 唾腺染色体制作容易。横纹清晰,是细胞学观察的好材料。
5. 突变性状多,而且多数是形态突变,便于观察。
此外,由于果蝇具有多线染色体以及生活史不同发育阶段的特点和基因组结构特点使其成为生物学研究中的模式生物,同时在遗传学研究中得到广泛而深入的研究。
果蝇的生活周期长短与温度有密切关系。一般来说, 30 ℃ 以上温度能使 果蝇不育或死亡,低温能使生活周期延长,生活力下降,饲养果蝇的最适温度为 20 ~ 25 ℃。 果蝇在 25 ℃ 时,从卵到成蝇需 10 天左右,成虫可活 26 ~ 33 天。
生活周期长短与饲养温度的关系
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10 ℃
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15 ℃
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20 ℃
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25 ℃
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卵→幼虫
幼虫→成虫
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57 天
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18 天
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8 天
6 天
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5 天
4 天
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果蝇的每一体细胞有 8 个染色体( 2n=8 ),可配成 4 对,其中 3 对在雌雄果蝇中是一样的,称常染色体。另外一对称性染色体,在雌果蝇中是 XX ,在雄蝇中是 XY 。
果蝇的雌雄在幼虫期较难区别,但到了成虫期区别相当容易。雄性个体一般较雌性个体小,腹部环纹 5 条,腹尖色深,第一对脚的跗节前端表面有黑色鬃毛流苏,称性梳( Sex combs )。雌性环纹 7 条,腹尖色浅,无性梳。
二、 实验用具及材料
双筒解剖镜、麻醉瓶、 镊子、 毛笔、白瓷板、 吸水纸、 普通果蝇野生型及不同突变型果蝇、乙醚、玉米粉、糖、酵母粉、琼脂等。
三、 实验方法及步骤
1. 配制培养基
培养果蝇用的容器可以采用较粗的指管或用广口瓶,这些容器均需在实验前进行高温灭菌才能使用。果蝇是以酵母菌作为主要食料的,因此实验室内凡能发酵基质,都可用作果蝇饲料。常用的饲料有玉米饲料、米粉饲料、香蕉饲料等。配方如下表:
果蝇饲料的几种配方
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玉米饲料
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米粉饲料
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香蕉饲料
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水(毫升)
琼脂(克)
蔗糖(克)
香蕉浆(克)
玉米粉(克)
米粉(克)
麸皮(克)
酵母粉(克)
丙酸(毫升)
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200
1.5
13
—
17
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1.4
1
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100
2
10
—
—
8
8
1.4
1
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50
1.6
—
50
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—
—
1.4
0.5 — 1
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1 )玉米饲料:
i) 取应加水量的一半,加入琼脂,煮沸,使充分溶解,加糖,煮沸溶解。
ii) 取另一半水混和玉米粉,加热,调成糊状。
iii) 将上述两者混和,煮沸。以上操作都要搅拌,以免沉积物烧焦。
iv )待稍冷后加入酵母粉及丙酸,充分调匀,分装。按附表用量配制,可得饲料 200 毫升左右。
2 )米粉饲料:方法与玉米饲料相同,用米粉代替玉米粉。
3 )香蕉饲料:
i) 将熟透的香蕉捣碎,制成香蕉浆。
ii) 将琼脂加到水中煮沸,使充分溶解。
iii) 将琼脂溶液加入香蕉浆,煮沸。
iv )待稍冷后加入酵母粉及丙酸,充分调匀,分装。
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