一、实验目的
1、观察各种不同细胞的形态大小,从而对细胞的分类,进化及分化有所了解。
2、判断和识别光学显微镜下各种细胞器的形态,大小和数目。
3、掌握普通光学显微镜及测微尺的使用方法。
二、实验原理
生物种类繁多,形态大小各异.构成生物有机体的最基本结构和功能单位—一细胞山冈其物种、部位和功能不同在形态与大小上呈现一些区别。由于细胞比较小,我们借助于显微镜就可以观测出细胞形态大小的差异。
光学显微镜的最高分辨率为0.2μm,而细胞器大郎分在0.1μm和10μm之间,所以光学显微镜下可见到一股细胞器的外部形态。较大的细胞器和细胞核,质体等还可见到其细微结构。
细胞器往往由特殊物质组成,因而可通过对特异物质的区别染色把各种结构区分开束,每种细胞器都有特殊的形态、大小、分布位置及数目,这也是我们判断。识别细咆器的依据。而每种细胞器在不同细胞、不同发育时期和不同生理状态下的形态大小会有所不同。所以细胞器的观察可用来判断细胞的生理状和发育情况。投们在取材和观察上要注意各种细胞在不同细胞中的特殊性。
三、实验用品
1、器材
显微镜、测微尺
2、试剂
Wright溶液:Wright真粉剂0.1g
甲醇60ml
苏木精、硝酸银等
3、材料
真核、原核细胞涂片及切片,动、植物不同组织的切片及新鲜材料(见实验方法中所列)。
四、实验方法
(一)细胞形态与大小的观测
1、用目镜测微尺分别在高倍镜下和油镜下测量镜台测微尺,从而算出称所用显微镜中目镜测微尺每格所代表的实际长度。
2、用高倍镜及油镜检测各种切片,并且用目镜测微尺测量细胞和细胞核的长、短径的长度。
3.选取细胞膜和核膜界限清晰的切片或涂片测量。测量时可旋转目镜(测微尺)及移动载玻片,置被测细胞于测微尺轴线上。
4.根据测量结果计算各种细胞及细胞核的体积。
①椭球形:
V=4nab2/3
式中:a——长半径
b——短半径
②圆球球:
V= πr2
式中r——半径
③V=πr2h
式中:r——半径
h——高度
表1-1实验结果
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细胞名称
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形态特征
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细胞体积
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核体积
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核质比例
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酵母
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大肠杆菌
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洋葱表皮细胞
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蛙血细胞
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(二)细胞显微结构观察
注意观察下列结构
1、细胞核及核仁
①不同细胞的核和核仁
洋葱根尖切片
黄花菜二倍体与四倍体根切片(示范)